Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma ManusiaAlkaline phosphatase (ALP) ditemukan di banyak jaringan, termasuk tulang, hati, usus, ginjal, dan plasenta. Pengukuran serum ALP sangat menarik dalam penyelidikan dua kelompok kondisi: penyakit hepatobiliary (hepatitis, sirosis atau keganasan) dan penyakit tulang yang berhubungan dengan peningkatan aktivitas osteoblastik (rakhitis anak dengan defisiensi vitamin D, penyakit Paget, hiperparatiroidisme dalam kerangka, metastasis karsinoma).

Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase DEA dalam Serum dan Plasma Manusia


Prinsip Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Metode yang dioptimalkan berdasarkan rekomendasi DGKC (German Society of Clinical Chemistry, 1972) dan SCE (Scandinavian Society of Clinical Chemistry).
Dalam larutan basa, ALP mengkatalisis hidrolisis p-nitrofenil fosfat menjadi p-nitrofenol dan fosfat.
Laju pembentukan p-nitrofenol, sebanding dengan aktivitas ALP, diukur pada 405 nm.


Reagen Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

R1 ALKALINE PHOSPHATASE                            Buffer
D.E.A. (Diethanolamine) buffer pH 10 (25°C) 1 mol/L 
Magnesium Chloride                                                 0.5 mmol/L 
Preservative


R2 ALKALINE PHOSPHATASE                         Substrate
p-nitrophenyl phosphate                                                 10 mmol/L

Setelah dilarutkan: Reagen Kerja diklasifikasikan sebagai vial R1.


Persiapan Reagen Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Gunakan alat yang tidak tajam untuk melepas tutup botolnya. Tambahkan segera isi vial R2 ke vial R1. Homogenkan secara perlahan dan tunggu hingga larut sempurna.

Stabilitas dan Penyimpanan Reagen

Reagen jangan sampai terkena sinar matahari langsung, tertutup rapat dalam botol asli pada 2-8°C, bila disimpan dan digunakan seperti yang dijelaskan pada insert kit, reagen akan stabil pada :
Belum dibuka:
• Sampai dengan tanggal kedaluwarsa yang tertera pada label kit.

Setelah dibuka:
• Segera menyusun kembali substrat (vial R2)
• Isi vial R1 (Buffer) stabil minimal 6 bulan.

Setelah dilarutkan:
• Transfer jumlah yang diminta dan simpan dalam botol asli pada 2-8°C.
• Reagen kerja stabil setidaknya selama 30 hari.
• Buang reagen jika keruh atau jika absorbansi pada 405 nm > 0,800.
• Jangan gunakan reagen yang kedaluwarsa.


Pengumpulan dan Penanganan Sampel Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phospatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Serum yang tidak hemolisis atau plasma yang diheparin segera didinginkan.
Aktivitas ALP stabil dalam spesimen selama :
• 2-3 hari pada 2-8°C.
• 1 bulan pada –25 °C.

Prosedur Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Metode Manual
Diamkan reagen dan spesimen pada suhu kamar.

Pipet ke dalam kuvet termostat dengan panjang jalur

1 cm (37°C):

Reagent

1000 Β΅L

Standard / Control or Specimen

10 Β΅L

Mencampur. Setelah 1 menit pada 405 nm, catat absorbansinya setiap menit selama 3 menit.

Hitung perubahan absorbansi per menit (DAbs/min).



Perhitungan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Contoh, dengan Prosedur manual, (Panjang jalur 1 cm, 37°C, 405 nm):
IU/L = (DAbs/mnt) x 5450

Β΅kat/L = IU/L / 60

Nilai Rujukkan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Nilai Rujukkan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phospatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Anak-anak: Nilai dapat ditingkatkan (hingga tiga kali lipat selama masa pubertas) Contoh nilai yang diberikan untuk informasi: 245-768 IUI/L 37°C
Setiap laboratorium harus menetapkan kisaran normalnya sendiri untuk populasi yang dilayaninya.

Gangguan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Gangguan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phospatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Batasan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia

Hindari serum hemolisis.
Untuk tinjauan yang lebih komprehensif tentang faktor-faktor yang mempengaruhi pengujian ini, lihat publikasi Young D.S.

Sumber : 
Biolabo. (2022). Alkaline Phosphatase ( DEA). Maizy ; France. 



Post a Comment

0 Comments