Teknik Fiksasi Sediaan Histologik dan Sitologi: Panduan Lengkap untuk Laboratorium Medis

Table of Contents

INFOLABMED.COM - Fiksasi adalah tahap kritis dalam preparasi sediaan histologik dan sitologi untuk diagnosis patologi. 

Proses ini menentukan kualitas pengawetan struktur sel dan jaringan. 

Baca juga : Fiksasi Sediaan Sitologi

Artikel ini membahas teknik fiksasi sediaan histologik dan sitologi secara komprehensif, termasuk pilihan larutan, prosedur, dan kesalahan yang harus dihindari.

1. Fiksasi Sediaan Histologik

Tujuan: Mengawetkan arsitektur jaringan dan komponen seluler untuk analisis mikroskopis.

A. Larutan Fiksasi Umum

1. Netral Buffered Formalin (NBF) 10%

   • Komposisi:
     • Formalin 37%: 100 ml
     • Aquades: 900 ml
     • NaH₂PO₄: 4 g
     • Na₂HPO₄: 6.5 g (pH 7.2–7.4)
   • Keunggulan:
     • Cocok untuk sebagian besar jaringan.
     • Mempertahankan struktur inti dan sitoplasma (Gambar 4.1).
   • Kekurangan:
     • Waktu fiksasi lama (24 jam untuk jaringan kecil, 2–6 minggu untuk otak).

2. Larutan Bouin

   • Komposisi:
     • Asam pikrat 2.1%: 1500 ml
     • Formalin 37%: 500 ml
     • Asam asetat glasial: 100 ml
   • Keunggulan:
     • Ideal untuk pewarnaan trichrome.
     • Penetrasi cepat.
   • Kekurangan:
     • Menyebabkan jaringan berwarna kuning (harus dibilas dengan alkohol 70%).

B. Prosedur Fiksasi Jaringan

1. Potong jaringan tebal maksimal 4 mm.
2. Rendam dalam larutan fiksasi dengan rasio 1:20 (jaringan:fiksatif).
3. Agitasi lembut untuk memastikan penetrasi merata.
4. Waktu fiksasi:
   • NBF: 12–24 jam (jaringan kecil).
   • Bouin: 24 jam (hindari penyimpanan lama).

Contoh Kesalahan:

• Fiksasi tidak merata → Vakuolisasi sel (Gambar 4.2).
• pH terlalu asam → Artefak formalin pigment (Gambar 4.4).

2. Fiksasi Sediaan Sitologi

Tujuan: Mencegah autolisis dan mempertahankan morfologi sel untuk pemeriksaan sitopatologi.

A. Jenis Fiksasi Sitologi

1. Fiksasi Basah

   • Larutan yang Digunakan:
     • Alkohol 95%: Paling umum, mencegah penyusutan sel.
     • Metanol absolut: Untuk sediaan berbasis cairan (ThinPrep).
     • Campuran eter:alkohol (1:1): Hasil optimal tapi berbahaya.
   • Prosedur:
     • Rendam sediaan segera setelah pengambilan sampel.

2. Fiksasi Coating (Semprot)

   • Contoh: Hairspray berkandungan alkohol tinggi.
   • Kegunaan: Pengiriman jarak jauh (tidak dianjurkan untuk sampel berdarah).

3. Fiksasi Kering

   • Metode: Pengeringan udara atau hotplate (maks 50°C).
   • Kegunaan: Pemeriksaan cepat (2–3 menit) untuk keganasan hematologi.

4. Fiksasi Khusus

   • Carnoy: Untuk sampel hemoragik (lisis sel darah merah).

B. Tips Fiksasi Sitologi

• Hindari pengeringan sel sebelum fiksasi.
• Gunakan alkohol 95% untuk hasil pewarnaan optimal.
• Jarak semprot 25–30 cm jika menggunakan fiksasi coating.

Baca juga : Mengenal Fiksasi Coating: Metode Efektif dalam Preparasi Sediaan Sitologi

Perbandingan Fiksasi Histologik vs. Sitologi

Parameter	Histologik	Sitologi
Larutan Umum	Formalin 10%, Bouin	Alkohol 95%, Metanol
Waktu Fiksasi	12–24 jam	Segera (≤5 menit)
Target	Struktur jaringan	Morfologi sel tunggal

Artikel ini hanya untuk tujuan informasi. Untuk nasihat atau diagnosis medis, konsultasikan dengan profesional.***