Cara Pewarnaan BTA yang Benar: Tahapan, Prinsip, dan Interpretasi Hasil

Table of Contents

 

INFOLABMED.COM - Pemeriksaan BTA (Bakteri Tahan Asam) menjadi salah satu metode penting dalam diagnosis tuberkulosis (TBC). 

Salah satu tahapan utama dalam pemeriksaan ini adalah proses pewarnaan BTA menggunakan metode khusus agar bakteri dapat terlihat jelas di bawah mikroskop.

Baca Juga: Kelebihan dan Kekurangan Pewarnaan BTA: Analisis Mendalam untuk Indonesia

Lalu, bagaimana sebenarnya cara pewarnaan BTA yang benar? Apa saja langkah dan prinsip kerjanya?

Berikut penjelasan lengkap mengenai prosedur pewarnaan BTA metode Ziehl-Neelsen yang umum digunakan di laboratorium medis.

Apa Itu Pewarnaan BTA?

Pewarnaan BTA adalah teknik pewarnaan mikrobiologi untuk mendeteksi bakteri tahan asam seperti Mycobacterium tuberculosis.

Bakteri ini memiliki dinding sel kaya lipid dan asam mikolat sehingga sulit diwarnai dengan metode biasa. 

Karena itulah digunakan teknik pewarnaan khusus yang disebut metode Ziehl-Neelsen.

Pada hasil mikroskopis:

• BTA positif → tampak merah/fuchsia

• Latar belakang → berwarna biru

Prinsip Pewarnaan BTA

Prinsip pemeriksaan BTA adalah kemampuan bakteri tahan asam mempertahankan warna utama (carbol fuchsin) meskipun telah diberi larutan peluntur asam alkohol.

Bakteri yang tidak tahan asam akan kehilangan warna merah dan menyerap pewarna tandingan (counterstain), sedangkan bakteri tahan asam tetap berwarna merah.

Alat dan Bahan Pewarnaan BTA

Alat

• Kaca objek

• Rak pewarnaan

• Pinset

• Lampu spiritus atau bunsen

• Mikroskop

• Pipet tetes

Bahan

• Sampel dahak

• Carbol fuchsin

• Asam alkohol

• Methylen blue

• Air mengalir

Cara Pewarnaan BTA Metode Ziehl-Neelsen

Berikut tahapan pemeriksaan yang umum dilakukan:

1. Pembuatan Sediaan

Ambil sampel dahak yang purulen menggunakan ose atau stik, lalu buat apusan tipis pada kaca objek.

Setelah itu:

• Keringkan di udara

• Fiksasi dengan pemanasan ringan

2. Pewarnaan Carbol Fuchsin

Teteskan carbol fuchsin hingga menutupi seluruh apusan.

Kemudian panaskan perlahan sampai muncul uap tanpa mendidihkan pewarna.

Diamkan sekitar 5 menit agar pewarna masuk ke dinding sel bakteri.

3. Pembilasan

Bilas preparat menggunakan air mengalir secara perlahan.

4. Dekolorisasi

Teteskan larutan asam alkohol hingga warna merah pada preparat memudar.

Tahap ini bertujuan melunturkan warna pada bakteri non tahan asam.

5. Pembilasan Ulang

Cuci kembali preparat dengan air bersih.

6. Counterstain

Berikan methylen blue selama sekitar 1 menit untuk mewarnai latar belakang.

7. Pengeringan

Bilas preparat, lalu keringkan pada suhu ruang.

8. Pemeriksaan Mikroskopis

Amati preparat menggunakan mikroskop dengan lensa imersi 100x.

Interpretasi Hasil Pewarnaan BTA

Hasil pemeriksaan dibaca berdasarkan jumlah bakteri yang ditemukan.

BTA Positif

• Tampak batang merah/fuchsia

• Menunjukkan adanya bakteri tahan asam

BTA Negatif

• Tidak ditemukan batang merah

• Hanya tampak latar belakang biru

Faktor yang Memengaruhi Hasil Pemeriksaan

Beberapa faktor dapat memengaruhi akurasi hasil, seperti:

• Kualitas sampel dahak

• Ketebalan apusan

• Pemanasan berlebihan

• Proses dekolorisasi terlalu lama

• Reagen kadaluarsa

• Teknik pemeriksaan mikroskopis

Karena itu, pemeriksaan BTA membutuhkan ketelitian tenaga laboratorium.

Kelebihan dan Kekurangan Pemeriksaan BTA

Kelebihan

• Biaya relatif murah

• Prosedur sederhana

• Cepat dilakukan

• Cocok untuk skrining TBC

Kekurangan

• Sensitivitas lebih rendah dibanding TCM

• Membutuhkan jumlah bakteri cukup banyak

• Tidak dapat mendeteksi resistensi obat

Pentingnya Pemeriksaan BTA dalam Diagnosis TBC

Pemeriksaan BTA masih menjadi salah satu metode penting dalam program pengendalian tuberkulosis karena mudah dilakukan di banyak fasilitas kesehatan.

Meski kini sudah tersedia pemeriksaan molekuler seperti TCM, pemeriksaan mikroskopis BTA tetap banyak digunakan terutama pada daerah dengan keterbatasan alat.

Cara pewarnaan BTA dilakukan menggunakan metode Ziehl-Neelsen dengan prinsip pewarnaan tahan asam untuk mendeteksi Mycobacterium tuberculosis. 

Baca Juga: Pemeriksaan BTA: Memahami Batang Ramping Lurus 0.4 x 3 µm dalam Diagnosis TBC

Proses ini meliputi pewarnaan carbol fuchsin, dekolorisasi asam alkohol, dan counterstain methylen blue sebelum diamati di bawah mikroskop.

Ketelitian prosedur dan kualitas sampel sangat menentukan akurasi hasil pemeriksaan BTA dalam membantu diagnosis tuberkulosis.