Panduan Lengkap: Mengenal Gambar Bilik Hitung Trombosit Dan Prosedur Penghitungan Sel

Table of Contents

INFOLABMED.COM - Pemeriksaan jumlah trombosit merupakan salah satu indikator penting dalam diagnosis berbagai kondisi kesehatan.

Trombosit, atau keping darah, berperan vital dalam proses pembekuan darah.

Ketidaknormalan jumlah trombosit dapat mengindikasikan gangguan serius yang memerlukan perhatian medis.

Meskipun saat ini banyak laboratorium menggunakan alat otomatis, metode manual dengan bilik hitung trombosit tetap menjadi dasar dan penting untuk dipahami.

Artikel ini akan mengupas tuntas tentang bilik hitung trombosit, struktur 'gambarnya', serta prosedur lengkap cara menghitung sel trombosit secara manual.

Pentingnya Pemeriksaan Trombosit dalam Diagnosis Medis

Trombosit memiliki fungsi utama dalam hemostasis, yaitu mekanisme tubuh untuk menghentikan pendarahan.

Ketika pembuluh darah terluka, trombosit akan berkumpul dan membentuk sumbat awal untuk menutup luka.

Jumlah trombosit yang terlalu rendah, dikenal sebagai trombositopenia, dapat meningkatkan risiko pendarahan berlebihan.

Sebaliknya, jumlah trombosit yang terlalu tinggi, disebut trombositosis, dapat menyebabkan pembentukan bekuan darah yang tidak diinginkan.

Pemeriksaan hitung trombosit membantu dokter mendiagnosis dan memantau kondisi seperti demam berdarah, purpura trombositopenik idiopatik (ITP), leukemia, serta efek samping dari obat-obatan tertentu.

Oleh karena itu, akurasi dalam penghitungan trombosit sangat krusial.

Mengenal Bilik Hitung Trombosit (Hemocytometer)

Bilik hitung trombosit, atau hemocytometer, adalah alat kaca tebal khusus yang digunakan untuk menghitung sel-sel darah.

Alat ini memiliki dua area hitung identik yang dipisahkan oleh alur.

Setiap area hitung terdiri dari jaringan garis-garis presisi yang membentuk kotak-kotak berukuran spesifik.

Jenis bilik hitung yang paling umum digunakan adalah Improved Neubauer dan Fuch-Rosenthal.

Bilik Improved Neubauer sering dipakai untuk menghitung semua jenis sel darah, termasuk trombosit.

Sedangkan bilik Fuch-Rosenthal memiliki area hitung yang lebih besar, cocok untuk sampel dengan jumlah sel yang sangat rendah.

Struktur dan Area Hitung Bilik Improved Neubauer

Pada bilik Improved Neubauer, area hitung utama adalah kotak besar berukuran 3x3 mm².

Kotak besar ini kemudian dibagi lagi menjadi sembilan kotak sedang.

Trombosit umumnya dihitung pada kotak sedang di tengah, yang lebih lanjut dibagi menjadi 25 kotak kecil.

Setiap kotak kecil di area tengah ini berukuran 1/25 mm x 1/25 mm.

Bidang hitung trombosit yang spesifik adalah lima kotak sedang (satu di tengah dan empat di sudut) dari sembilan kotak sedang keseluruhan.

Luas total area hitung untuk trombosit pada Improved Neubauer adalah 5 x (1/25 mm²) = 1/5 mm² atau 0.2 mm².

Pemahaman mengenai 'gambar' atau pola garis pada bilik ini sangat esensial sebelum memulai penghitungan.

Prosedur Lengkap Cara Menghitung Sel Trombosit Manual

Penghitungan trombosit manual memerlukan ketelitian tinggi dan kepatuhan terhadap standar prosedur operasional.

Persiapan Sampel dan Larutan Pengencer

Sampel darah yang digunakan biasanya adalah darah vena dengan antikoagulan EDTA.

EDTA mencegah pembekuan darah tanpa mengubah morfologi sel.

Larutan pengencer trombosit yang umum digunakan adalah larutan Rees-Ecker atau amonium oksalat 1%.

Larutan Rees-Ecker mengandung brilliant cresyl blue untuk mewarnai trombosit dan natrium sitrat untuk antikoagulan.

Amonium oksalat 1% memiliki fungsi melisiskan sel darah merah sehingga trombosit dapat terlihat lebih jelas.

Pastikan semua reagen dalam kondisi baik dan tidak terkontaminasi.

Teknik Pengenceran Trombosit

Pengenceran yang tepat sangat krusial untuk mendapatkan jumlah sel yang akurat.

Pengenceran umum yang sering digunakan adalah 1:100 atau 1:20.

Untuk pengenceran 1:100, campurkan 20 µL darah dengan 1980 µL larutan pengencer.

Prosedur ini bisa menggunakan pipet Thoma atau mikropipet yang terkalibrasi.

Setelah dicampur, homogenkan larutan dengan hati-hati selama 1-2 menit.

Kemudian, inkubasi campuran tersebut selama 10-15 menit pada suhu kamar agar trombosit mengendap dan terlihat jelas.

Mengisi Bilik Hitung

Sebelum mengisi, bersihkan bilik hitung dan kaca penutupnya dengan alkohol 70% dan keringkan dengan tisu bebas serat.

Letakkan kaca penutup di atas bilik hitung secara hati-hati.

Buang beberapa tetes pertama dari pipet yang berisi larutan sampel yang telah diencerkan.

Teteskan satu tetes kecil pada salah satu celah pengisian bilik hitung.

Biarkan larutan meresap secara kapiler ke bawah kaca penutup.

Pastikan bilik terisi penuh tanpa gelembung udara dan tidak meluber.

Diamkan bilik yang sudah terisi selama 5-10 menit untuk memberi kesempatan trombosit mengendap sempurna.

Pengamatan di Bawah Mikroskop

Letakkan bilik hitung di atas meja mikroskop.

Gunakan perbesaran objektif 10x untuk menemukan area hitung, kemudian beralih ke perbesaran objektif 40x (fokus kering) untuk menghitung sel.

Trombosit akan terlihat sebagai benda bulat kecil, agak refraktil, dan tidak berwarna atau berwarna kebiruan (jika menggunakan Rees-Ecker).

Morfologinya harus seragam dan terpisah satu sama lain.

Hindari menghitung benda asing atau artefak yang mungkin mirip trombosit.

Area Penghitungan dan Prinsip Perhitungan

Pada bilik Improved Neubauer, hitung trombosit dalam lima kotak sedang di area tengah (satu di tengah dan empat di sudut).

Untuk setiap kotak sedang, hitung trombosit pada 25 kotak kecil di dalamnya.

Gunakan prinsip 'atas-kiri masuk, bawah-kanan keluar' untuk sel yang menempel pada garis batas.

Ini berarti sel yang menempel pada garis batas atas dan kiri kotak dihitung, sedangkan yang menempel pada garis batas bawah dan kanan tidak dihitung.

Jumlahkan semua trombosit yang ditemukan dalam kelima kotak sedang tersebut.

Rumus Perhitungan Trombosit

Setelah menghitung jumlah trombosit, gunakan rumus berikut untuk mendapatkan jumlah trombosit per µL darah:

Rumus: Jumlah Trombosit/µL = (N x FP) / (Luas Area Terhitung x Kedalaman Bilik)

• N = Jumlah trombosit yang dihitung dalam kelima kotak sedang.

• FP = Faktor Pengenceran (misalnya, 100 jika pengenceran 1:100).

• Luas Area Terhitung = 0.2 mm² (untuk 5 kotak sedang pada bilik Improved Neubauer).

• Kedalaman Bilik = 0.1 mm.

Sehingga, rumus dapat disederhanakan menjadi: Jumlah Trombosit/µL = N x FP x 50.

Sebagai contoh, jika Anda menghitung 50 trombosit dalam area terhitung pada pengenceran 1:100, maka jumlah trombosit adalah 50 x 100 x 50 = 250.000 trombosit/µL.

Faktor-faktor yang Mempengaruhi Akurasi Perhitungan

Beberapa faktor dapat mempengaruhi keakuratan hasil penghitungan trombosit manual.

Kesalahan dalam pengambilan sampel seperti pembentukan mikrokoagulan dapat menyebabkan hasil palsu rendah.

Pipet yang tidak terkalibrasi atau teknik pengenceran yang kurang presisi akan menghasilkan rasio pengenceran yang salah.

Pengisian bilik hitung yang tidak tepat, seperti adanya gelembung udara atau volume yang kurang, juga akan mengganggu distribusi sel.

Kesalahan dalam identifikasi sel, misalnya menghitung artefak atau sel lain yang menyerupai trombosit, harus dihindari.

Penggunaan mikroskop yang tidak terawat atau kurangnya pengalaman pemeriksa juga dapat menjadi sumber kesalahan.

Pentingnya kontrol kualitas dan kalibrasi rutin untuk memastikan hasil yang akurat.

Memahami gambar bilik hitung trombosit dan menguasai prosedur penghitungan sel trombosit manual adalah keterampilan fundamental dalam laboratorium hematologi.

Meskipun menantang, ketelitian dan kepatuhan terhadap setiap tahapan prosedur akan menghasilkan data yang akurat dan dapat diandalkan.

Penghitungan trombosit manual tetap relevan sebagai metode konfirmasi atau di lingkungan dengan sumber daya terbatas, menegaskan pentingnya penguasaan teknik ini bagi setiap profesional kesehatan.