Pembuatan Kurva Standar Hemoglobin: Panduan Lengkap untuk Analisis Spektrofotometri

Table of Contents

 

INFOLABMED.COM – Pembuatan kurva standar hemoglobin merupakan prosedur penting dalam kalibrasi alat spektrofotometer untuk pengukuran kadar hemoglobin (Hb) yang akurat. 

Artikel ini akan membahas prinsip, bahan, dan langkah-langkah pembuatan kurva standar hemoglobin menggunakan metode cyanmethemoglobin yang direkomendasikan WHO.

Baca juga : Aspek Umum Anemia

Apa Itu Kurva Standar Hemoglobin?

Kurva standar hemoglobin adalah grafik hubungan antara absorbansi (nilai OD) dan konsentrasi hemoglobin standar yang digunakan untuk:

• Mengkalibrasi alat spektrofotometer
• Memastikan akurasi hasil pemeriksaan Hb
• Memenuhi standar kualitas laboratorium

Alat dan Bahan yang Dibutuhkan

1. Bahan

   • Larutan standar hemoglobin (contoh: HiCN)
   • Reagen Drabkin (kalium ferrisianida + sianida)
   • Aquades bebas ion

2. Alat

   • Spektrofotometer
   • Kuvet
   • Pipet volumetrik
   • Labu takar

Langkah Pembuatan Kurva Standar Hemoglobin

1. Persiapan Larutan Standar

• Encerkan larutan standar Hb (20 g/dL) menjadi berbagai konsentrasi:
  • 5 g/dL
  • 10 g/dL
  • 15 g/dL
  • 20 g/dL

2. Proses Pengukuran Absorbansi

1. Campur 5 mL reagen Drabkin dengan 20 µL larutan standar
2. Inkubasi 10 menit
3. Baca absorbansi pada λ 540 nm
4. Catat nilai OD untuk setiap konsentrasi

3. Pembuatan Grafik

Konsentrasi (g/dL)	Absorbansi (540 nm)
5	0.25
10	0.50
15	0.75
20	1.00

• Plot data ke grafik (sumbu X = konsentrasi, sumbu Y = absorbansi)
• Hitung persamaan regresi linear (y = mx + c)

Validasi Kurva Standar

1. Koefisien Korelasi (R²) harus >0.995
2. Slope harus sesuai dengan spesifikasi reagen
3. Lakukan kontrol kualitas harian

Baca juga : Indeks Eritrosit [MCV, MCH, MCHC & RBC Distribution Width]

Tips Penting

• Gunakan larutan standar bersertifikat
• Hindari kontaminasi reagen Drabkin
• Kalibrasi spektrofotometer secara rutin

Follow Media Sosial Infolabmed.com melalui Telegram, Facebook, dan Twitter/X. Dukung pengembangan konten kami dengan Donasi via DANA.