Membedah Dunia Pewarnaan Histologi: Menyingkap Struktur Jaringan Tubuh Manusia

Table of Contents

 

INFOLABMED.COM - Dunia medis mengenal istilah histologi, yaitu studi mikroskopis jaringan dan organ melalui pemotongan, pewarnaan, dan pemeriksaan potongan tersebut di bawah mikroskop. 

Histologi, yang sering disebut sebagai anatomi mikroskopis dan histokimia, memungkinkan visualisasi struktur jaringan dan perubahan karakteristik yang mungkin dialami jaringan tersebut. 

Oleh karena itu, histologi digunakan dalam diagnosis medis, studi ilmiah, autopsi, dan investigasi forensik.

Setelah sampel jaringan menjalani fiksasi, pemrosesan, pembedahan, pewarnaan, maka jaringan tersebut dapat dianalisis melalui mikroskop dan temuannya ditafsirkan oleh dokter ahli patologi. 

Pewarnaan histologi yang dipilih untuk spesimen tertentu tergantung pada pertanyaan investigasi yang diajukan. 

Interpretasi lanjutan dari slide histologi yang dikombinasikan dengan riwayat kesehatan pasien dapat memberikan dampak yang tak ternilai pada pengobatan dan prognosis.

Pengetahuan dasar tentang persiapan jaringan, termasuk pewarnaan, penting untuk diketahui saat menafsirkan laporan patologi pada biopsi rawat inap atau jalan. 

Tidak selalu dokter patologi yang melakukan interpretasi menganalisis sampel jaringan secara menyeluruh dengan menggunakan pewarnaan histologi yang tepat, dan kekurangan ini dapat menghambat diagnosis yang akurat.

Jenis Pewarnaan Histologi

Ada empat jenis dasar jaringan manusia yang dapat diwarnai dan dilihat menggunakan berbagai teknik histologi. 

Jaringan epitel, jaringan ikat, jaringan otot, dan jaringan saraf memiliki kesamaan tetapi terlihat sangat berbeda secara struktural setelah pewarnaan. 

Setiap pewarnaan berfungsi untuk menonjolkan fitur atau komponen penting dalam suatu jenis jaringan.

Hematoksilin dan Eosin (H&E)

Hematoksilin adalah pewarna dasar yang mewarnai protein menjadi warna biru, sedangkan eosin mewarnai protein menjadi warna merah muda. 

Kedua pewarna ini biasanya digunakan bersama untuk menunjukkan organel dan protein intraseluler.

Pewarnaan Khusus

Selain H&E, terdapat pewarnaan khusus yang dirancang untuk menonjolkan protein tertentu. 

Pewarnaan khusus ini sangat bermanfaat karena dapat menonjolkan protein spesifik dengan sangat baik. 

Namun, karena sifatnya yang spesifik, struktur lain tidak akan terlihat.

 Oleh karena itu, beberapa slide sering dibuat dari spesimen tertentu sehingga beberapa pewarnaan dapat dilakukan untuk mengumpulkan informasi lengkap yang dibutuhkan.

Contoh Pewarnaan Khusus

• Gram Stain: Berguna untuk membedakan spesies bakteri.
• Giemsa Stain: Umum digunakan dalam hematologi untuk kemampuan superiornya dalam mewarnai sumsum tulang belakang, sel plasma, dan sel mast.
• Periodic Acid Schiff (PAS): Memeriksa struktur yang mengandung molekul karbohidrat dalam jumlah tinggi.
• Masson's Trichrome: Mewarnai serat kolagen berwarna biru.
• Congo Red: Berguna dalam studi amiloidosis.
• Prussian Blue: Berguna untuk mengidentifikasi simpanan zat besi dalam tubuh.
• Mucicarmine: Mewarnai musin, sekresi yang diproduksi dalam sel epitel dan jaringan ikat.
• Sudan Black: Mewarnai struktur yang mengandung lipid seperti trigliserida dan lipoprotein.
• Oil Red O: Mirip dengan Sudan Black, pewarna yang paling umum digunakan pada lemak atau lipid hidrofobik.
• Silver Stain: Digunakan untuk studi histopatologi penyakit berbasis akumulasi di neurologi.
• Nissl Stain: Digunakan untuk mempelajari struktur neuronal di otak dan sumsum tulang belakang.
• Papanicolaou Stain: Teknik pewarnaan sitologi yang paling dikenal untuk mendeteksi kanker serviks pada pasien wanita.

Pemilihan pewarnaan histologi yang tepat sangat penting untuk mendapatkan informasi akurat mengenai kondisi jaringan. 

Konsultasikan dengan dokter Anda untuk memahami lebih lanjut tentang prosedur medis yang mungkin melibatkan biopsi dan analisis jaringan.

Persiapan Jaringan untuk Pewarnaan Histologi

Sebelum pewarnaan khusus dapat dilakukan, sampel jaringan harus menjalani persiapan melalui tahapan berikut:

Fiksasi

Fiksasi menggunakan bahan kimia untuk mengawetkan struktur jaringan dalam bentuk alaminya dan melindunginya dari degradasi dengan mengikat silang protein secara permanen. 

Formalin Berpenyangga Netral adalah pilihan umum untuk langkah ini. 

Fiksasi penting untuk prosedur pewarnaan histologi lainnya karena dengan mempertahankan komposisi kimia jaringan, sampel menjadi lebih keras dan membuat fase pemotongan lebih mudah.

Dehidrasi

Penambahan etanol berfungsi untuk dehidrasi sampel. Ini menghilangkan air dari sampel dan selanjutnya mengeraskan jaringan untuk pemeriksaan mikroskop cahaya. 

Setelah etanol diterapkan, dan setelah dehidrasi jaringan selesai, xylene digunakan untuk menghilangkan etanol.

Pembebanan

Pembebanan adalah proses memasukkan sampel ke dalam parafin wax atau resin plastik untuk meningkatkan proses pengambilan struktur seluler.

Langkah ini harus dilakukan dengan hati-hati jika tujuannya untuk melakukan imunohistokimia karena parafin wax akan menghambat penetrasi antibodi, dan menyebabkan hasil yang salah.

Pemotongan

Pemotongan melibatkan pemasangan spesimen pada mikrotom dan memotongnya menjadi irisan tipis. 

Ketebalan yang diinginkan adalah 4-5 mikrometer sehingga dapat diwarnai dan diletakkan pada slide mikroskop untuk pemeriksaan.

Pengambilan Antigen

Langkah ini bertujuan untuk mengambil kembali antigen yang mungkin tertutup pada tahap fiksasi dan pembedahan. 

Jika ikatan silang protein menyembunyikan situs antigen, respons imunohistokimia mungkin tidak begitu kuat. 

Pengambilan antigen dicapai melalui metode pemanasan dan proteolitik untuk memecah ikatan silang dan mengungkapkan epitop dan antigen yang sebelumnya tertutup.

Meskipun langkah ini berisiko mendenaturasi fiksatif dan antigen itu sendiri, metode pengambilan antigen yang berhasil dapat menghasilkan intensitas imunohistokimia yang jauh lebih efektif.

Pemilihan pewarnaan histologi yang tepat merupakan langkah krusial dalam diagnosis penyakit melalui analisis jaringan. 

Pewarnaan yang berbeda memiliki fungsi spesifik untuk menonjolkan komponen atau struktur tertentu dalam jaringan. 

Dengan pemahaman yang baik tentang berbagai jenis pewarnaan histologi dan persiapan jaringan, dokter dan tenaga medis lainnya dapat lebih akurat menafsirkan hasil pemeriksaan biopsi dan menentukan diagnosis yang tepat.***