Pap Smear: Pemeriksaan Andalan untuk Deteksi Dini Kanker Serviks

Table of Contents

 

Hasil Pewarnaan Papanicolaou. (Foto : universe84a.com)

INFOLABMED.COM - Pap smear merupakan pemeriksaan skrining yang sudah lumrah dilakukan untuk deteksi dini kanker serviks. 

Pemeriksaan Pap Smear menggunakan pewarnaan papanicolaou, yaitu pewarnaan khusus untuk melihat kelainan pada sel-sel leher rahim (serviks). 

Artikel Pap Smear akan membahas tentang Pap smear secara lengkap, mulai dari pengenalan Pap smear, prinsip pewarnaan Pap, prosedur pewarnaan Pap, interpretasi hasil Pap smear, hingga hal-hal penting yang perlu diperhatikan.

Pap smear dinamai berdasarkan penemunya, yaitu Dr. George Papanicolaou pada tahun 1942.

Pemeriksaan Pap smear menggunakan Pap stain untuk mewarnai komponen seluler pada sediaan apusan sel yang telah dieksfoliasi (lepas) dari berbagai macam sumber, seperti vagina, serviks, sekret prostat, cairan pleura, cairan spinal, dan lain-lain.

Prinsip Pewarnaan Pap

Pap stain menggunakan kombinasi pewarna basa dan pewarna asam. Pewarna basa akan mewarnai komponen sel yang bersifat asam, sedangkan pewarna asam akan mewarnai komponen sel yang bersifat basa. Prinsip pewarnaan ini didasarkan pada muatan ionik dari unsur-unsur penyusun sel, serta daya tarik-menolak antara ion dan pewarna.

• Pewarna inti sel: Hematoksilin - memberikan warna biru
• Pewarna sitoplasma (counterstain): Orange G6, Eosin-alkohol (EA-36)
  • Orange G6 mewarnai keratin (karsinoma skuamosa berkeratin) dengan warna jingga terang.
  • EA-36 terdiri dari Light Green SF yellowish (memberikan warna hijau pada sel parabasal, sel kolumnar, sel skuamosa intermediet, leukosit, dan histosit) dan Eosin Y (memberikan warna pada sitoplasma sel skuamosa superfisial, silia, inti sel, dan sel darah merah).
  • EA 65 dikembangkan khusus untuk pewarnaan sampel sel yang lebih tebal.

Bahan dan Alat yang Dibutuhkan untuk Pewarnaan Pap

Untuk melakukan pewarnaan Pap, diperlukan bahan dan alat sebagai berikut:

• Larutan hematoksilin Harris 0,5%
• Asam hidroklorida 0,25% dalam air suling
• Orange G (OG) dan EA-36 atau EA-50 (Eosin – Azure)
• Etanol
• Alkohol
• Air suling
• Xilen
• Timer
• Coverslip
• Media mounting
• Jarum Coplin
• Mikroskop cahaya

Prosedur Pewarnaan Pap

Prosedur pewarnaan Pap meliputi langkah-langkah berikut:

1. Fiksasi apusan segera dalam alkohol 95% selama 5-15 menit.
2. Hidrasi: Celupkan apusan secara berurutan ke dalam larutan etanol dengan konsentrasi berturut-turut 80% (v/v), 70% (v/v), dan 50% (v/v) masing-masing selama 6 kali celupan.
3. Bilas perlahan dengan air suling.
4. Pewarnaan dengan hematoksilin Harris encer selama 2 sampai 3 menit.
5. Bilas dengan air suling.
6. Celupkan ke dalam asam hidroklorida 0,25% sebanyak 6 kali, kemudian dilanjutkan dengan asam hidroklorida 0,5% sebanyak 3 kali.
7. Alirkan air kran selama 5 menit.
8. Periksa sediaan di bawah mikroskop untuk melihat apakah inti sel sudah terwarnai dengan baik. (Jika terlalu pekat, lakukan dekolorisasi dalam alkohol-asam; jika terlalu pucat, ulangi pewarnaan dengan hematoksilin).
9. Dehidrasi melalui tahapan perendaman dalam larutan air suling dan etanol dengan konsentrasi berturut-turut 50% (v/v), 70% (v/v), 80% (v/v), dan 95% (v/v) masing-masing selama 6 kali celupan.
10. Pewarnaan dengan OG-6 selama 2 menit.
11. Bilas dengan alkohol 95% (v/v) sebanyak 3 kali penggantian dengan masing-masing 6 kali celupan
12. Pewarnaan dengan EA-36 (atau EA-50) selama 2 menit.
13. Bilas dengan alkohol 95% (v/v) sebanyak 3 kali penggantian.
14. Dehidrasi dalam etanol absolut (2 kali penggantian).
15. Hilangkan alkohol dengan menggunakan xilen (6 kali celupan), diikuti dengan perendaman dalam xilen sebanyak 3 kali penggantian (masing-masing 6 kali celupan).
16. Mount dengan media mounting yang sesuai.

Interpretasi Hasil Pap Stain

• Inti Sel: Biru
• Sitoplasma: Beragam warna seperti merah muda, biru, kuning, dan hijau keabu-abuan
• Sel Acidophilic: Merah atau jingga
• Sel Superfisial: Merah muda
• Sel Darah Merah: Jingga
• Sel Basophilic: Hijau kebiruan
• Sel Intermediate dan Parabasal: Hijau
• Eosinofil: Jingga kemerahan
• Sel Metaplastik: Dapat mengandung warna biru/hijau dan merah muda
• Candida (Jamur): Merah
• Trichomonas (Parasit): Hijau keabu-abuan

Hal Penting yang Perlu Diperhatikan pada Pap Smear

Pap smear, yang juga dikenal sebagai Pap test, adalah pemeriksaan skrining untuk kanker serviks. Pemeriksaan ini bertujuan untuk menemukan adanya sel-sel abnormal atau prakanker pada leher rahim.

Ada dua metode pewarnaan Pap, yaitu:

• Metode Regresif: Pewarnaan terlebih dahulu diikuti dengan dekolorisasi menggunakan asam hidroklorida untuk diferensiasi sel. Metode ini lebih umum digunakan.
• Metode Progresif: Pewarna diaplikasikan secara berurutan tanpa memerlukan tahapan pencucian atau dekolorisasi. Metode ini cocok untuk sampel apusan yang tidak melekat kuat pada kaca.

Signifikansi Klinis Pewarnaan Papanicolaou

Pewarnaan Pap memiliki beberapa signifikansi klinis, diantaranya:

• Deteksi dini kanker serviks melalui Pap smear (Pap test)
• Pemeriksaan sel kanker myeloma pada hati
• Skrining kanker tiroid
• Pemeriksaan karsinoma sel
• Pemeriksaan dan karakterisasi tumor jinak
• Identifikasi Candida dan Chlamydia trachomatis

Pap smear umumnya dianjurkan untuk wanita berusia di atas 21 tahun, terutama yang memiliki faktor risiko tinggi terkena kanker atau infeksi, seperti:

• HIV positif
• Sistem imun yang lemah akibat kemoterapi atau transplantasi organ

Wanita berusia 65 tahun ke atas dengan riwayat hasil Pap smear normal biasanya tidak memerlukan pemeriksaan ini lagi di masa mendatang.

Hal penting lainnya yang perlu diperhatikan adalah:

• Apusan tidak boleh sampai kering.
• Apusan dapat disimpan dalam larutan fiksatif selama 3 hari jika diperlukan, namun fiksasi yang terlalu lama dapat mempengaruhi reaksi pewarnaan.
• Sediaan harus ditangani dengan hati-hati saat pembilasan dan pencucian. Perlakuan kasar dapat menyebabkan hilangnya spesimen.
• Pap smear yang baik harus mengandung sel endoserviks.***