Panduan Membuat Larutan Buffer TAE dalam Beberapa Langkah

Table of Contents

 

Alat dan Bahan Pembuatan Larutan Buffer TAE. (Foto :hoidla.spordimuuseum.ee)

INFOLABMED.COM - Larutan TAE (Tris-asetat-EDTA) adalah salah satu bahan yang sangat penting dalam proses elektroforesis gel agarosa untuk menganalisis produk DNA. 

Apa Itu Larutan TAE?

Larutan TAE adalah larutan yang terdiri dari Tris base, asam asetat, dan EDTA (Tris-asetat-EDTA). 

Larutan TAE adalah buffer yang umum digunakan dalam elektroforesis gel agarosa untuk menganalisis produk DNA hasil dari amplifikasi PCR, protokol pemurnian DNA, atau percobaan kloning DNA.

Buffer TAE memiliki kekuatan ionik rendah dan kapasitas buffering rendah, sehingga cocok untuk elektroforesis DNA besar (> 20 kilobase).

Bahan yang Dibutuhkan untuk Larutan TAE

Sebelum memulai proses pembuatan larutan TAE, pastikan Anda memiliki semua bahan dan peralatan yang diperlukan. Berikut adalah daftar bahan yang Anda perlukan:

• EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid)
• Tris base
• Asam asetat glasial
• Air deionisasi
• Peralatan laboratorium seperti gelas beaker, silinder bergradasi, pH meter, dan standar kalibrasi

Langkah-langkah Pembuatan Larutan TAE

1. Persiapkan Larutan Stok EDTA

• Timbang 93,05 gram EDTA disodium salt dan larutkan dalam 400 mililiter air deionisasi.
• Sesuaikan pH larutan dengan natrium hidroksida (NaOH) hingga sekitar 8,0.
• Tambahkan air hingga volume akhir 500 mililiter.

2. Buat Larutan Stok TAE

• Timbang 242 gram Tris base dan larutkan dalam sekitar 750 mililiter air deionisasi.
• Tambahkan 57,1 mililiter asam asetat glasial dan 100 mililiter EDTA 0,5 M (pH 8,0).
• Sesuaikan volume larutan hingga 1 liter.

3. Persiapkan Larutan Kerja TAE

• Larutan kerja TAE 1x dibuat dengan mendilusi larutan stok 50x dengan air deionisasi.
• Konsentrasi solut akhir adalah 40 mM Tris-asetat dan 1 mM EDTA.

Membuat larutan TAE tidaklah sulit, namun tetap membutuhkan ketelitian dalam mengukur bahan-bahannya. 

Pastikan Anda mengikuti langkah-langkah dengan benar dan memiliki semua bahan yang diperlukan sebelum memulai prosesnya.

Jadi, demikianlah panduan singkat tentang cara membuat larutan TAE dalam beberapa langkah. Semoga informasi ini bermanfaat bagi Anda yang tertarik dalam bidang biokimia dan biologi molekuler.***