Gold Standard Pemeriksaan Golongan Darah: Metode Tabung

Table of Contents

 

(Foto : Poltekkes Denpasar, 2022)

INFOLABMED.COM - Pemeriksaan golongan darah adalah prosedur medis yang penting untuk keperluan transfusi darah, operasi, atau diagnosis kondisi medis tertentu. 

Salah satu metode yang menjadi standar emas dalam pemeriksaan golongan darah adalah menggunakan metode tabung. 

Metode ini dapat dilakukan dalam dua cara, yaitu serum grouping dan cell grouping. 

Cell grouping adalah salah satu metode yang paling umum digunakan untuk menentukan golongan darah seseorang dengan memeriksa antigen pada sel darah merah. 

Metode Tabung dalam Pemeriksaan Golongan Darah

Pemeriksaan golongan darah metode tabung melibatkan penggunaan suspensi sel yang dibuat dari eritrosit (sel darah merah) dan pelarut NaCl 0,9%. 

Konsentrasi suspensi sel ini dapat bervariasi, dan semakin tinggi konsentrasinya, semakin banyak eritrosit yang terdapat dalam suspensi sel tersebut. 

Ini berarti semakin tinggi pula kadar antigen yang terkandung dalam suspensi sel tersebut. Kadar antigen yang tinggi akan menyebabkan reaksi antigen-antibodi yang lebih kuat.

Penting untuk diketahui bahwa suspensi sel 5% adalah konsentrasi yang umumnya digunakan dalam pemeriksaan serologi golongan darah, sesuai dengan rekomendasi dari Organisasi Kesehatan Dunia (WHO).

Konfirmasi Pemeriksaan Golongan Darah ABO dan Rhesus Metode Rserve 2 Forward

Konfirmasi pemeriksaan golongan darah ABO dan Rhesus menggunakan metode Rserve 2 Forward adalah langkah penting untuk memastikan keakuratan hasil pemeriksaan. 

Proses ini dilakukan untuk memverifikasi golongan darah donor dan pasien dengan lebih pasti.

Tujuan dari konfirmasi ini adalah untuk menentukan apakah terdapat antigen pada sel darah merah (cell grouping) dan untuk memastikan ada atau tidaknya antibodi dalam serum atau plasma (serum grouping).

Alat dan Bahan yang Diperlukan

Untuk melakukan pemeriksaan golongan darah menggunakan metode tabung, berikut adalah alat dan bahan yang diperlukan:

• Sampel suspensi 5%
• Test sel 5% A, B, O
• Antisera A, Antisera B
• Larutan NaCl 0,85%
• Tabung Serologi
• Mikroskop
• Tabung Sentrifuge
• Pipet Tetes
• Rak Tabung
• Sentrifuge

Cara Kerja Pemeriksaan Golongan Darah

Berikut adalah langkah-langkah dalam melakukan pemeriksaan golongan darah menggunakan metode tabung:

1. Biarkan reagensia pada suhu kamar sebelum digunakan dan simpan kembali pada suhu 2-8°C setelah digunakan.
2. Siapkan contoh darah dengan antikoagulan yang akan diperiksa
3. Lakukan perawatan contoh darah yang akan diperiksa mulai dari pemisahan plasma dari sdm (sel darah merah) pencucian hingga pembuatan suspensi sel 5%
4. Siapkan lembar kerja pemeriksaan golongan darah ABO
5. Siapkan 6 (enam) buah tabung serologi untuk masing - masing mahasiswa / kelompok yang sudah ditandai.
6. Isi masing - masing tabung dengan :
7. Tabung 1 : 2 tetes anti - A + 1 tetes sel 5% 
8. Tabung 2 : 2 tetes anti - B + 1 tetes sel 5% 
9. Tabung 3 : 1 tetes sel A 5% + 2 tetes serum / plasma 
10. Tabung 4 : 1 tetes sel B 5% + 2 tetes serum / plasma 
11. Tabung 5 : 1 tetes sel O 5% + 2 tetes serum / plasma 
12. Tabung 6 : 1 tetes sel 5% + 2 tetes serum / plasma 
13. Tabung 7 : 1 tetes sel 5% + 2 tetes anti -D 
14. Tabung 8 : 1 tetes sel 5% + 2 tetes BA 6%
15. Kocok perlahan agar homogen
16. Sentrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 15 detik
17. Goyangkan tabung dengan perlahan dan perhatikan adanya aglutinasi secara makroskopis bila diperlukan dengan menggunakan mikroskop (perbesaran objektif 10 x)

 Pembacaan hasil : 

• Perhatikan supernatan semua tabung, apakah ada hemolise atau tidak. 
• Bacalah satu persatu hasil reaksinya dengan mengoyang perlahan tabung dan memutarnya kita perhatikan sedimennya : Ciri - ciri positif Sedimen bersatu dan tepinya tidak merata. Ciri - ciri Negatif : Sedimen selnya padat dan tepinya bulat + rata. 
• Dinyatakan negatif bila sedimen tersuspensi kembali dengan mudah (homogen).
• Dinyatakan positif bila sedimen tidak mudah tersuspensi kembali (bergumpal - gumpal).

Tentukan derajat aglutinasi sesuai dengan hasil reaksi yang terjadi.

4+ : Semua sedimen bersatu , cairan jernih

3+ : Sedimen terpecah → 3-4 segmen, cairan jernih

2+ : Gumpalan lebih banyak dan kasar, cairan agak keruh

1+ Gumpalan sangat banyak dan halus, cairan keruh tampak berwarna kemerah - merahan

+ : Sepintas masih terlihat seperti gumpalan halus dengan cairan keruh. Aglutinasi jelas → mikroskopis

- : tidak ada aglutinasi / homogen

Interpretasi Hasil Pemeriksaan Golongan Darah ABO dan Rhesus Metode Rserve 2 Forward:

Catatan : Apabila pada metode tabung hasil pengamatan menunjukkan Rh negatif, maka harus dilanjutkan ke pemeriksaan Weak D.

Keuntungan Metode Tabung (Tube) → Rekomendasi pemeriksaan golongan darah di Laboratorium karena Aglutinasi lemah dapat dibaca (karena lebih sensitif).