Proses Pewarnaan Jaringan: Panduan Lengkap untuk Pengecatan Histopatologi

Table of Contents

 

Proses Pewarnaan Jaringan. (Foto : Tangkapan layar youtube @lakenormanpathology)

INFOLABMED.COM - Pengecatan histopatologi adalah langkah krusial dalam analisis jaringan biologis, dan salah satu metode yang umum digunakan adalah pewarnaan dengan cat Hematoxylin-Eosin (HE). 

Selain HE, juga ada pewarnaan khusus seperti PAS, Gomori, ZN, Malory, serta teknik yang lebih spesifik seperti immunohistokimia (IHC) dengan pewarnaan seperti ER, PR, CD20, dan LMP.

1. Deparafinisasi

Deparafinisasi adalah tahap awal dalam proses pewarnaan jaringan. Preparat jaringan yang telah diblok parafin dimasukkan ke dalam tiga tahap xylol selama masing-masing 3 menit. 

Tahap ini bertujuan untuk menghilangkan lapisan parafin pada jaringan. Setelahnya, preparat dilap dengan kain kasa untuk membersihkan sisa-sisa parafin.

2. Rehidrasi

Setelah deparafinisasi, langkah selanjutnya adalah rehidrasi. Preparat dimasukkan ke dalam seri alkohol dengan konsentrasi yang semakin rendah, yaitu 100%, 95%, 80%, dan 70%, masing-masing selama 2 menit. Rehidrasi ini penting untuk mengembalikan jaringan ke kondisi air.

3. Pembersihan dengan Air Mengalir

Preparat kemudian dicuci dengan air mengalir selama 3 menit. Air mengalir ini perlu ditampung dalam wadah, dan preparat sebelumnya dicelupkan ke dalam dua mangkok air dengan tiga kali celup. Ini membantu menghilangkan sisa alkohol pada jaringan.

4. Pengecatan Inti

Langkah selanjutnya adalah pengecatan inti. Preparat dimasukkan ke dalam larutan Meyer hematoksilin dan dibiarkan selama 7 menit. 

Hematoksilin berikatan dengan inti sel, memberikan warna biru gelap yang penting untuk kontras dalam histopatologi.

5. Pembersihan dengan Air Mengalir

Setelah pengecatan inti, preparat dicuci lagi dengan air mengalir selama 3 menit. Sama seperti sebelumnya, preparat dicelupkan ke dalam dua mangkok air dengan tiga kali celup untuk membersihkan hematoksilin yang berlebihan.

6. Counter Stain

Langkah ini melibatkan pewarnaan kontras dengan larutan eosin. Preparat dicelupkan ke dalam larutan eosin sebanyak 7 kali celup. 

Eosin memberikan warna merah atau jingga pada sitoplasma sel, membantu membedakan komponen seluler.

7. Pembersihan dengan Air

Preparat kembali dicuci dengan air mengalir menggunakan tiga wadah berbeda dengan tiga kali celup. Tahap ini penting untuk membersihkan eosin yang berlebihan.

8. Dehidrasi

Dehidrasi adalah langkah untuk mengeluarkan air dari jaringan sebelum jaringan tersebut dimasukkan ke dalam medium yang tidak bercampur air seperti xylol. 

Preparat dicelupkan ke dalam seri alkohol dengan konsentrasi yang semakin tinggi, yaitu 70%, 80%, 95%, dan 100%, masing-masing selama 3 kali celup. 

Setelahnya, preparat diusap dengan kain kasa di sekitar jaringan dan ditunggu hingga kering.

9. Clearing

Preparat kembali dimasukkan ke dalam xylol selama masing-masing 2 menit. Tahap ini membantu menggantikan alkohol yang tersisa dalam jaringan dengan xylol, yang pada gilirannya membantu dalam proses mounting.

10. Mounting

Mounting adalah langkah terakhir dalam pewarnaan jaringan. Pada tahap ini, preparat diberi lapisan bahan transparan seperti entelan untuk melindungi dan mengawetkan jaringan dari mikroba dan bakteri. Preparat kemudian ditutupi dengan objek glass.

Proses pewarnaan jaringan adalah langkah kritis dalam analisis histopatologi yang memerlukan ketelitian dan pemahaman yang mendalam.

 Dengan mengikuti langkah-langkah di atas, Anda dapat memastikan bahwa hasil pewarnaan Anda optimal dan memberikan informasi yang akurat dalam analisis jaringan biologis.***

Ikuti berita terkini dengan mengikuti kami di Google News atau klik tautan ini Google News INFOLABMED.