Pembuatan Apusan Darah

Cara Pembuatan dan Pewarnaan Apusan Darah

INFOLABMED.COM - Sediaan apus darah adalah salah satu teknis pemeriksaan sel-sel darah menggunakan mikroskop.

Pemeriksaan sediaan darah umumnya digunakan untuk membantu pemeriksaan kelainan darah dan juga infeksi parasite Apusan Darah Tepi (ADT) dalam bahasa Inggris dikenal sebagai Blood Smear.

Selama hapusan darah tepi, teknisi laboratorium akan memeriksa tiga komponen utama darah: Trombosit, Sel darah putih, Sel darah merah.

Spesimen yang digunakan adalah darah vena dengan antikoagualn EDTA atau darah kapiler. Bila menggunakan darah vena, pembuatan Apus Darah Tepi harus dilakukan sebelum 1 jam sejak sample berhasil ditampung dan penyimpanannya pada suhu 18-25C

Alat yang digunakan adalah Spreader, bila tidak ada spreader siap pakai dapat juga dibuat dari kaca dayng dipotong salah satu sudutnya dengan pemotong kaca, sehingga tersisa sepanjang 1,5 cm.

kaca penutup juga dapat dipakai. Kaca objek yang dioakai untuk pemeriksaan harus bersih, kering, jernih, bagian tepi rata dan tidak ada sisa noda lemak atau detergen agar apusan tidak berlubang.

Cara pembuatan Apusan Darah Tepi ;

Bersihkan dan keringkan kaca objek
Teteskan sample pada kira kira 2 cm dari salahsatu pinggirnya atau kira kita ½ cm dari tempat menuliskan label identitas
Perhatikan besar tetesan yang ideal untuk apusan darah adalah sepanjang +- 3cm
Bersihkan dan keringkan kaca preparat . terapkan spreader di depan tetesan, dengan membentuk sudut 30-40 derajat dengan kaca objek. Kemudian geser spreader ke belakang hingga menyentuh tetesan
Tetesan akan melebar di sepanjang pinggir spreader. Segera dorong spreader kedepan dengan cepat dan tekanan yang cukup

Untuk melakukan pemeriksaan sel darah pada apusan darah tepi, maka perlu dilakukan pewarnaan. Langkah langka pewarnaan Apusan Darah Tepi dengan metode Wright-Giemsa :

Fiksasi preparat dengan alcohol, dengan mencelupkan atau menggenangi preparat selama 5 menit
Keringkan preparat pada suhu kamar
Siapkan preparat pada bak pewarnaan
Genangi demham pewarna Wright. Ratakan pewarna hingga seluruh permukaan preparat tergenangi. Inkubasi selama 2 menit.
Tetesi dengan aquades, inkubasi selama 2 menit
Bilas dengan air yang mengalir
Lanjukan pembilasan sampai apusan tampak berwarna merah keunguan.
Tempatkan kembali preparat pada bak pewarnaan
Genangi dengan pewara Giemsa. Inkubasi selama 1 menit
Bilas dengan air mengalir sedang
Celupkan ke dalam larutan asam asetat 0,5%
Keringkan preparat, kemudian preparat siap untuk diperiksa.

Zat pewarna Wright terdapat dalam bentuk serbuk atau cairan siap pakai. Untuk membuat laruan koloid siap pakai, serbuk dilarutkan kedalam metil alcohol. 0,1g serbuk digerus dalam mortat dengan ditambahkan sedikit demi sedikit metil alcohol sampai terpakai 60mL.

Simpan larutan dalam botol berwarna, kocok isinya setiap hari. Larutan yang lewat 10 hari cukup matang untuk dipakai.

Botol larutan Wight harus dijauhkan dari uap asam atau basa dan selalu tertutup rapat agar udara lembab tidak masuk.

Untuk membuat pewarna giemsa, 1g bubuk pewarna dimasukkan kedalam btol 200-250 mL, kemudian ditambahkan methanol 100mL dan dihangatkan pada suhu 50C.

Diamkan pada suhu tersebut selama 15 menit, lalu kocok. Setelah itu larutan siap digunakan setelah disaring dan biarkan beberapa jam.

Zat pulas Giemsa biasanya tersedia sebagai larutan dalam. Jika membuat sendiri, susunan larutannya terdiri dari Azur-II eosin 3.0g ; Azur II 0,8g Gliserin 250 mL; Metil akohol 250mL.

Sebelum dipakai, larutan pokok harus diencerkan 20x dengan buffer pH 6,4 atau dengan aquades pH 6,4 : 1 tetes giemsa Pokok untuk setiap 1 mL buffer.

Zat pulas giemsa yang telah diencerkan tidak tahan lebih lama dari 1 hari,maka hanya dibuat seperlunya.

Instagram.com/analis_kesehatan

Hasil pewarnaan Apusan Darah Tepi menurut Pewarnaan Romanowsky:

Letak	Komponen Sel	warna
Inti Sel	Kromatin	Ungu
	Anak Inti	Biru Muda
Sitoplasma	Eritroblast	Biru Tua
	Eritrosit	Ungu Tua
	Retikulosit	Biru Keabu-abuan
	Limfosit	Biru
	metamiefosit	Merah Muda
	Monosit	Biru Keabu-abuan
	Mielosit	Merah Muda
	Neutrofil	Merah Muda-Oranye
	Promielosit	Biru
	Basofil	Biru
Granula	Promielosit	Merah/ungu
	Basofil	Ungu Kehitaman
	Eosinofil	Merah-Oranye
	Neutrofil	Ungu
	Granulasi Toksik	Biru Tua
	Trombosit	Ungu
Benda Lain	Auer Body	Ungu
	Cabot ring	Ungu
	Howell-Jolly Body	ungu
	Dohe body	Biru Muda

Sumber :

Kiswari,R.2014.Hematologi dan Transfusi.Jakarta:Penerbit Erlangga.

KLIK

DONASI VIA DANA ke 085862486502 Bantu berikan donasi jika artikelnya dirasa bermanfaat. Donasi Anda ini akan digunakan untuk memperpanjang domain www.infolabmed.com. Donasi klik Love atau dapat secara langsung via Dana melalui : 085862486502. Terima kasih.